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技术文章 / article
人结肠癌细胞株的细胞形态是不太规则的三角形
原载自：www.co-bioer.com[技术资料频道] 2016-12-05 浏览次数：1628
人结肠癌细胞株是一种成团、贴壁生长的细胞,如果状态好的情况下,生长非常快，细胞形态是不太规则的三角形.在低浓度时，此细胞长梭型（不好描述），高浓度时长成一张地毯，后者才是状态的。.
收到人结肠癌细胞株atcc后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml*培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。
因时间及温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题（如：比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落）。人结肠癌细胞株在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，必须恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态。
