鉴别ATCC细胞株真伪的方法

　　原代培养物经传代成功后即为细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系，如可以连续培养， 则称为连续细胞系，培养50代以上并无限培养下去。 所以ATCC细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲，可培养到40-50代。ATCC细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。对于人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。

　　鉴别ATCC细胞株真伪的方法：

　　一．利用干扰实验即可辨别ATCC细胞株是否检测目的抗原，方法如下：

　　(1) 将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液(2) 37℃孵育15分钟后，代替原试剂盒中的检测抗体(3) 后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物(4) 实验完毕后，检测其标准曲线，如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配，试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原，该试剂盒为伪劣假造ATCC细胞株。 (5) 如果标准曲线无线性，则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰，影响了其实际试剂盒抗体的检测作用，则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。

　　二． 如果购买了两盒同一公司的ATCC细胞株A和B，利用交叉实验即可辨别ATCC细胞株是否造假，方法如下：

　　(1) 取出购买的试剂盒A的包被板两条。

　　(2) 一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。

　　(3) 另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。

　　(4) 后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物。

　　(5) 实验完毕后，检测两条标准曲线，如果两条标准曲线一致则说明两个ATCC细胞株检测的同一个指标而非A和B，即该试剂盒为伪劣假造ATCC细胞株。

　　(6) 如果两条标准曲线不一致则说明两个ATCC细胞株检测的不同指标，试剂盒A只能检测A，不能检测B，即该试剂盒为正常的ATCC细胞株。

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