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ATCC细胞系的细胞培养步骤

原载自:www.co-bioer.com[技术资料频道]  2017-12-21  浏览次数:2067

   ATCC细胞系作为正常或肿瘤组织的模式细胞被广泛应用于科学研究和药物开发,然而很大一部分的细胞系被错误标记或被其它个体、组织、种系来源的细胞所替代,由于科学界无法解决此类问题以致大量因使用错误鉴定的细胞系而导致误导或存在潜在错误的学术论文发表。通过近年来的努力而开发出的STR分型方法已成为对人源细胞进行鉴定的标准方法,STR分型的应用成为*细胞错误鉴定这一问题的重要一步。
  ATCC细胞系的细胞培养步骤:
  一.培养基及培养冻存条件准备:
  1)准备培养基;北美胎牛血清,10%;双抗1%。
  2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
  3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
  二.ATCC细胞系的菌种处理:
  1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

 

 

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