ATCC细胞系的细胞培养小技巧

　　ATCC细胞系液体培养基的保存要冷藏，因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
　　ATCC细胞系的细胞培养小技巧:
　　1. 买细胞要去靠谱的地方买，比如 ATCC 或者斯信生物。一般上面会有针对细胞的介绍，这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
　　2. 不管是买的细胞，还是别人惠赠的细胞，刚拿到手赶紧的做两件事：检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存，冻存细胞复苏后第二天zui 好更换一次培养基。
　　3. 发现细胞有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时。污染、污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
　　4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快，比如说 MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢，比如 BT474，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
　　5. 对于娇弱的细胞，就得细心呵护。胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住，是每天。
　　ATCC细胞系注意事项:
　　1）操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。
　　2）点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。
　　3）操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。
　　4）不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。
　　5）瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。
　　6）吸溶液的吸管等不能混用。