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人结肠癌细胞株试验要点及说明

原载自:www.co-bioer.com[技术资料频道]  2018-09-26  浏览次数:1378

  人结肠癌细胞株的复苏,遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37.5度,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将*培养基加入50ml的小培养瓶内,约5ml左右,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
  人结肠癌细胞株的原位染色:
  (1)贴壁生长的对数期细胞铺在24孔或6孔板中(内有洁净盖玻片),让其爬片生长,待长到50%~80%满时,凋亡诱导剂处理细胞。
  (2)将不同时间点处理的细胞进行免疫荧光染色,染色步骤同上。
  (3)将染色的爬片细胞放于一张滴有少量甘油(5ml)的载玻片上,荧光显微镜或共聚焦激光扫描显微镜观察TFAR19在细胞中的定位。
  人结肠癌细胞株试验要点及说明:
  1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
  2.所使用的盖玻片应该为玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
  3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
  4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
  5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
  人结肠癌细胞株是一种成团、贴壁生长的细胞,如果状态好的情况下,生长非常快,细胞形态是不太规则的三角形.在低浓度时,此细胞长梭型(不好描述),高浓度时长成一张地毯,后者才是状态好的。

 

 

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