人结肠癌细胞株试验要点及说明

　　人结肠癌细胞株的复苏,遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37.5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将*培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。
　　人结肠癌细胞株的原位染色：
　　(1)贴壁生长的对数期细胞铺在24孔或6孔板中（内有洁净盖玻片），让其爬片生长，待长到50%~80%满时，凋亡诱导剂处理细胞。
　　(2)将不同时间点处理的细胞进行免疫荧光染色，染色步骤同上。
　　(3)将染色的爬片细胞放于一张滴有少量甘油（5ml）的载玻片上，荧光显微镜或共聚焦激光扫描显微镜观察TFAR19在细胞中的定位。
　　人结肠癌细胞株试验要点及说明：
　　1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
　　2．所使用的盖玻片应该为玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；
　　3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
　　4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
　　5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
　　人结肠癌细胞株是一种成团、贴壁生长的细胞,如果状态好的情况下,生长非常快，细胞形态是不太规则的三角形.在低浓度时，此细胞长梭型（不好描述），高浓度时长成一张地毯，后者才是状态好的。