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为什么STR鉴定对于ATCC细胞系来说很重要

原载自:www.co-bioer.com[技术资料频道]  2021-05-17  浏览次数:1790

   ATCC 成立于 1925 年,是大的生物资源中心,由美国 14 家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家全球性、非盈利生物标准品资源中心。
  进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得来。据估计,15-20%的实验室,实验中所使用的细胞已经不是原来的细胞系,或者与其它细胞系发生了交叉污染。显然,细胞系遭到污染、特征鉴别错误,将会极大的威胁着基于这些细胞而发表的论文质量和研究发现的正确性。为此,很多细胞库现在都要对提交来的细胞系进行鉴定,并对细胞系之间的交叉污染进行监测。
  现在很多机构都已经认识到这个的重要性,ATCC和FDA,这些机构要求对用于制药领域的实验中所使用的材料?—?诸如细胞系?—?应该进行“身份鉴定”和纯度测试。很多杂志也要求使用细胞系的文章提供STR指纹图谱数据。
  FDA建议研究人员在培养细胞的较早阶段(细胞培养第一周)来鉴定细胞系的身份。细胞在被冻存前应再一次进行鉴定;对于活跃生长的细胞,每两个月应鉴定一次;文献发表前也应对细胞系身份进行鉴定。
  细胞如何运输?收到细胞后如何处理?
  从美国运输过来的原装 ATCC 细胞都是冰冻形式,采用干冰运输的方式。在收到冻存细胞后,很重要的一点是迅速复苏。
  如果做不到立即复苏,需将细胞存储在液氮中。请不要将细胞存放在 -80 ℃ 冰箱,这会使细胞存活率迅速下降。
  使用什么培养基?
  复苏细胞时需要准备合适的培养基,血清和细胞生长所需的添加剂。虽然大多数细胞系可以在不止一种培养基中生长,但是当培养基改变时,细胞的性质也会变化。
  另外,有的培养基如 DMEM,各厂商提供产品虽然名称相同,但成分也会有差异。为了保证细胞最大的复苏率和维持细胞特性,建议购买细胞的时候,同时购买 ATCC 的培养基(见产品信息说明书和 ATCC 网站)。
  收到细胞后为什么没有说明书?
  为了响应环保号召,以及保证信息的快速更新。ATCC 细胞株寄送时没有随货附带纸质版说明书。
  ATCC细胞系说明书有关于细胞复苏和传代的详细步骤。除说明书外,还有另外一份重要文件——COA(Certificate of Analysis)。COA 中包含具体批次信息,如每管细胞的数量,建议复苏使用的培养基用量,已知细胞的传代代次等重要信息。

 

 

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