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购买细胞株前需要了解的相关技术知识

原载自:www.co-bioer.com[技术资料频道]  2021-06-21  浏览次数:1012

   稳定细胞株广泛用于许多重要的应用,包括生物制品(如重组蛋白和单克隆抗体)生产、药物筛选和基因功能研究。开发稳定细胞株的过程通常始于将所需的质粒转染至选定的宿主细胞,一般是 CHO 或 HEK 293 细胞。转染后,研究人员随后筛选和定量分析高表达的细胞克隆。
  细胞培养是细胞株开发的基础,无论是细胞转染,培养基优化,还是抗体表达检测等实验都在细胞培养的基础上完成。细胞培养是一个长流程,精细,耗费时间和人力的流程,定期的细胞计数接种,细胞换液,细胞转染等繁琐的实验对工作人员的挑战极大,且在高通量的人工操作中易带入污染而导致细胞培养及筛选的失败。高通量、标准化、自动化的细胞培养能帮助我们在获得更准确的结果的同时加速细胞株开发进度。
  一旦检测到这些高产细胞株,便进一步对这些细胞和其产生的蛋白质进行验证。传统上用于细胞株开发的手动筛选方法耗时且需要大量劳力,因此对于此类工作,存在对高通量、自动化解决方案的巨大需求。
  细胞培养方法多样讲解:
  透射光分割(分析)算法提高了不同细胞类型计数的准确性,通常用于对未染色的活细胞或固定细胞进行成像。另外还有使用荧光方法检测细胞核或细胞体的标准细胞计数方法。图像细胞计数法是一种将低倍率显微镜与成像和分析工具相结合的细胞计数技术。图像细胞计数法有助于在单次检测中提供关于大量细胞的细胞特性信息。
  图像细胞计数法可用于无标记或荧光标记细胞,可对一个细胞群多次执行,以随时提供关于细胞动力学的信息。
  活细胞成像是通过显微观察研究活细胞的细胞结构和功能。它可以实时显示和定量细胞的动态变化过程。活细胞成像包含多种方向和生物应用 — 无论是对活细胞进行长期动力学检测,还是进行荧光标记。
  细胞的单克隆源性验证在确保生物制药产品的纯度和均一性上至关重要,FDA 的政策和法规都强制要求生物制药企业提供清晰图片证据以证明单克隆抗体研发过程中的单克隆源性。这些要求对我们的单克隆接种及成像设备提出了更高的要求。细胞株开发就是发现源自单个细胞的克隆,其可稳定高表达目标治疗性蛋白。此过程的第一步是分离活的单细胞。有限稀释是一种依赖于统计概率的技术,但很耗时。

 

 

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