【产品推介】IL12细胞筛选模型

IL-12介绍

1989年，白细胞介素-12（IL-12）从EB病毒转化的B淋巴细胞上清液中被鉴定出来，当加入人外周血淋巴细胞时，因其能诱导干扰素（IFN）-γ和自然杀伤（NK）介导的细胞毒性而被命名为“自然杀伤刺激因子"。这种促炎症的异源二聚体细胞因子由共价连接的p40和p35亚基组成，是IL-12细胞因子家族中的一员，该家族还包括IL-23、IL-27、IL-35和IL-39等因子。IL-12和IL-23都是复合型细胞因子，有一个共同的IL-12 p40亚基并共用IL-12Rβ1受体，而其因子特异性则主要由IL-12 p35亚基以及IL-23p19亚基分别与IL-12Rβ2受体以及IL-23R受体结合而得到区分。p35和p40基因都需要在同一个细胞内表达并形成具有活性的异源二聚体并随后介导IL-12通路信号的产生。

吞噬细胞和树突状细胞受到细菌和微生物刺激后会分泌产生IL-12，伴随抗原呈递，IL-12诱导CD4+T细胞分化为产生IFN-γ的辅助性T细胞1（Th1）以及诱导淋巴因子激活的杀伤细胞和NK细胞。这些Th1细胞对细胞内病原体微生物（如嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、单核细胞增生李斯特菌和沙门氏菌属等）产生反应和促进滞发性超敏反应和巨噬细胞活化。

NK、B和T细胞是主要的表达IL-12受体的细胞，IL-12介导的信号通过将酪氨酸激酶TYK2和JAK2分别招募到IL-12Rβ1以及IL-12Rβ2来启动信号传递，随后这些激酶会进一步磷酸化并激活下游的转录因子STAT4， 随后STAT4复合物转移到细胞核，与Jun癌基因（c-Jun）一起，与IFN-γ启动子结合，导致IFN-γ转录和Th1分化。此外，IL-12相关的IFN-γ产生会进一步诱导趋化因子CXCL10的产生，进而抗血管生成。

IL-12与免疫类疾病的相关性及药物开发

在体内中，IL-12和IL-23由组织中的树突状细胞和巨噬细胞等“预警细胞"生成。在IL-12和IL-27的共同作用下CD4+ 辅助T细胞（Th）会分化为表达干扰素γ（IFNγ）的Th1细胞。而IL-23会与其它细胞因子共同作用，促使CD4+ Th细胞分化为Th17细胞，同时刺激Th17细胞分泌IL-17家族细胞因子，这些因子具有促炎症的作用。

急性炎症反应是身体对抗外来病原体入侵所产生的反应，然而当体内炎症相关细胞因子的水平失衡时，会引发炎症持续发生，导致风湿性关节炎、炎症性肠病（IBD，通常包括克罗恩病和溃疡性肠炎）、脊柱关节炎（SpA）和银屑病等慢性免疫类疾病。由于IL-12、IL-23/IL-17信号通路在释放促炎症细胞因子方面的重要作用，这一信号通路也成为开发治疗慢性炎症疾病的热门靶标，催生了多款重磅药物和在研疗法。

由强生开发的Ustekinumab是一款针对IL-12和IL-23的抗体拮抗剂，它可以特异性的结合白细胞介素IL-12和IL-23的p40蛋白亚单位，通过同时抑制IL-12和IL-23相关信号通路来达到治疗慢性炎症相关的免疫类疾病。该药自上市以来，已获批中重度斑块状银屑病、活动性银屑病关节炎、中重度活动性克罗恩病以及中重度活动性溃疡性结肠炎等多个相关适应症。在国内，康方生物自主开发的抗IL-12/IL-23单克隆抗体注射液AK101 也属于同类产品，该药物目前处于临床实验阶段，开展了针对中重度斑块状银屑病、中重度溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮适应症等多个临床研究。

IL-12与肿瘤免疫的相关性及药物开发

多项研究表明，IL-12可以通过多种免疫调节机制发挥抗肿瘤的作用，其作用机制主要有：

1）通过调节T细胞介导细胞免疫发挥抗肿瘤作用；

2）通过诱生IFN-γ介导抗肿瘤效应；

3）通过抑制血管生成发挥抗肿瘤作用。已有的数据表明修饰过的IL-12或人工合成的IL-12激动剂与PD-1&PD-L1, CTLA4等免疫检查点抑制剂联用可产生协同效应，增强药物的抗肿瘤作用。以IL-12为靶点，开发肿瘤免疫相关疗法的多项临床研究也正在进行中。（如下表所示）

针对IL-12药物的研发，科佰生物开发了相关细胞筛选模型，可用于细胞水平筛选IL-12激动剂或拮抗剂活性。

部分产品数据

IL12 Effector Reporter cell CBP74134

Figure 1. Dose Response of Recombinant Human IL12 in Human IL12 Effector Reporter Cells (C2).

Figure 2. Inhibition of IL12-induced Reporter Activity by IL-12/IL -23 p40 Neutralizing Antibody in IL12 Effector Reporter Cells (Clone2).