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atcc细胞的细胞核分离原理说明

原载自:www.co-bioer.com[技术资料频道]  2023-02-06  浏览次数:717

  细胞核作为atcc细胞的一个功能单位,完整地保存遗传物质,并指导RNA合成,进而表达出相应的蛋白,在一定程度上细胞核控制着细胞的代谢、生长、分化和繁殖活动。因此细胞核的分离是研究基因表达及细胞核形态结构的重要步骤。不同组织来源的细胞经匀浆后,可用分级离心等方法将细胞核进行分离纯化。
 
  细胞核的分离目前较常采用以蔗糖为介质的差速离心法,可分为细胞核分离和纯化两大步骤。细胞匀浆后,先以0.25mol/L。的蔗糖1000g离心洗涤,然后在0.34mol/L和0.88mol/L的蔗糖梯度中1500g离心15-20分钟,沉淀即为纯化的细胞核。现在细胞核的提取试剂已商业化生产,试剂盒说明书中会提供详细的操作步骤。细胞核被分离后,可经甲苯胺蓝染色在光学显微镜下观察,或直接在电子显微镜下观察核内染色质的分布情况。
 
  此外,在细胞增殖的研究中,人们常常将Brdu/Edu等底物掺入到增殖的细胞核DNA链中,再通过荧光素标记Brdu/Edu,继而显色增殖细胞的细胞核。在细胞凋亡研究中,人们常采用TUNEL染色标记凋亡细胞的细胞核。
 
  由于三维重建等优点,共聚焦显微镜在细胞成像技术中的地位逐渐突出。DAPI虽然常用,但是多数共聚焦显微镜没有紫外线波段的激发光,所以其他一系列更适用于共聚焦的核酸荧光染料被开发出来,比如TOTO系列等等。

 

 

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