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原载自：www.co-bioer.com[技术资料频道] 2025-11-17 浏览次数：9

　　打开ATCC或中科院细胞库目录，HT-29、HCT116、LoVo、SW480……等人结肠癌细胞株都标注“epithelial-like”。明明肿瘤微环境里还有成纤维、内皮、免疫细胞，为何建株时偏偏只剩“上皮脸”？

　　一、起点决定方向

　　结肠壁分四层，癌变90%始于最内层“粘膜上皮”。腺上皮细胞自带端粒酶再激活、Wnt/β-catenin突变等“第一击”，最易永生化；而平滑肌、间质细胞缺乏这些驱动突变，自然成不了“气候”。

　　二、酶消化“偏心”

　　建株常用胶原酶Ⅺ+Dispase鸡尾酒，作用靶点是间质胶原，目的在于“松”开上皮管腔。结果上皮细胞被温和剥离，成纤维细胞虽也被释放，却因其对胰酶更敏感、贴壁快而被后续差速贴壁2 h淘汰；上皮团块靠E-cadherin紧紧抱成球，反而保留下来。

　　三、培养基“拉偏架”

　　经典DMEM/F12+10%FBS里，表皮生长因子EGF、胰岛素是标配，它们通过EGFR→MAPK轴驱动上皮增殖；而对成纤维细胞，高浓度EGF反而促分化、易衰老。两周后，上皮长成“铺路石”样集落，间质细胞逐渐凋亡，视野里就只剩上皮样细胞。

　　四、形态可塑

　　肿瘤组织中原有部分细胞已发生EMT（上皮-间质转化），呈梭形。但体外缺少TGF-β、IL-6等间质信号，E-cadherin重新上调，细胞“回滚”成上皮状态，表现为铺路石或岛状排列，于是被记录为“epithelial-like”。

　　五、实用考量

　　上皮细胞角蛋白（CK20、CK8/18）阳性、E-cadherin膜表达，标志清晰，可做免疫荧光、类器官3D培养；若混杂大量vimentin阳性的间质细胞，不仅影响转染效率，还会干扰药物靶点判定。科研需求反向推动“选上皮、弃间质”。

　　人结肠癌细胞株之所以“多取上皮细胞样”，并非因为下层次细胞不想永生，而是解剖起点、酶消化偏爱、培养条件筛选与科研取向共同写下的“剧本”。了解这层偏向，才能提醒我们：研究肿瘤微环境时，别忘了把“被丢掉”的间质细胞重新请回舞台。