人结肠癌细胞株冻存的原则是要逐步缓慢降温

　　部分细胞在运输过程中，人结肠癌细胞株由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心（1000rpm，3min）收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。
　　人结肠癌细胞株冻存的原则是要逐步缓慢降温，以避免细胞内部形成冰晶对细胞造成伤害。
　　1) 贴壁细胞经消化、离心收集，悬浮细胞经离心收集；
　　2) 大约106个细胞加入1ml冻存液（细胞培养液和10%DMSO），用吸管吹打，使细胞分散成单细胞悬液；
　　3) 加入到冻存管中。如用1.8ml的冻存管，每管不要加入超过1.5ml的细胞悬液；
　　4) 在冻存管上标明细胞名称及冻存日期；
　　5) 用厚布或卫生纸包裹冻存管，置于4℃半小时，然后置于-20℃两小时，再置于-40℃两小时，然后置于液氮上方置夜；第二天将细胞置于液氮中；如果仅想提取细胞内的东西可以直接放在-20度的冰箱中。
　　6) 记下冻存管存放的位置，作好冻存记录。
　　人结肠癌细胞株注意事项：
　　1、观察细胞在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
　　2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
　　3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。
　　4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。
　　人结肠癌细胞株是一种成团、贴壁生长的细胞,如果状态好的情况下,生长非常快，细胞形态是不太规则的三角形.在低浓度时，此细胞长梭型（不好描述），高浓度时长成一张地毯，后者才是状态好的。