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中科院细胞所分享细胞的计数步骤

原载自:www.co-bioer.com[行情动态]  2019-09-13  浏览次数:1958

   中科院细胞所分享细胞的计数步骤
  当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体步骤如下:
  1.将细胞制成细胞悬液;
  2.将盖玻片放在血细胞计数板的2个小室上;
  3.吸取少许细胞悬液轻轻注入盖玻片边缘与计数板交界处;
  4.100倍镜下,用计数器计数每个小室的中央和四角的方格中的细胞;
  5.只计数压左边中线和上边中线的细胞;
  6.分别用双蒸水和75%酒精清洗计数板、盖玻片,并擦干。
  细胞计数的几大要点:
  1.进行细胞计数时,要求悬液中细胞数目不低于1×107 L-1,如果细胞数目很少要进行离心再悬浮于少量培养液中;
  2.要求细胞悬液中的细胞分散良好,否则影响计数准确性;
  3.取样计数前,应充分混匀细胞悬液,尤其时多次取样计数时更要注意每次取样都要混匀,以求计数准确;
  4.数细胞的原则是只数完整的细胞,若细胞聚集成团时,只按照1个细胞计算。如果细胞压在格线上时,则只计上线,不计下线,只计右线,不计左线;
  5.操作时,注意盖片下不能有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中,否则要重新计数。
  其中,初学者易犯的错误是计数前未将待测悬液吹打均匀。滴入细胞悬液时盖玻片下出现气泡。滴入悬液时的量太多,至使细胞悬液流入旁边的槽中。

 

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