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细胞株培养上清液中营养物质和细胞代谢物分析

原载自:www.co-bioer.com[行情动态]  2022-11-11  浏览次数:609

   对于细胞株培养时上清液的收集,把要收集上清的细胞重新在一次性培养板中培养,如果是贴壁细胞的话,在收集前24小时,改用不全培养基培养,即用不加血清的培养基。收集的时候,用移液枪吸取上清即可。
  细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,为促进细胞生长增殖提供物质基础,是培养细胞生长和繁殖的生存环境。合成细胞培养基是用化学成分明确的试剂配制
  的培养基,是目前常用的一类培养基,其组分稳定,主要包括糖类、必需氨基酸、维生素、无机盐类等。培养基组分的变化,对细胞生长会产生一定影响,如细胞生长形态、分裂速度等。同时,适宜的培养基组成与优选的细胞培养工艺对于提高蛋白类药物的产率,保证细胞培养批次之间的一致性、稳定关键质量属性等因素至关重要。因此,寻求一类合适的培养基组成,对细胞株培养具有重大意义。
  细胞生长状态的分析,除形态学观察外,还可对细胞培养上清液中细胞代谢物进行分析,通过考察细胞上清液中营养物和代谢物的变化,判断细胞在生长增殖过程中状态的优劣。鉴于此开发出了“细胞培养上清液方法包”,该技术可在短时间内同时分析数十种细胞培养上清液营养成份和代谢物的相对丰度变化。
  使用高效液相色谱仪和三重四极杆质谱联用,结合“细胞培养上清液方法”建立了细胞培养上清液中营养物质和细胞代谢物的液相色谱-串联质谱的同时分析方法,可为相关研究人员评估细胞生长状态、改进培养基组分提供参考。

 

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