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新闻动态 / news
人结肠癌细胞株进行液氮储存要注意些什么？
原载自：www.co-bioer.com[行情动态] 2025-11-19 浏览次数：150
细胞株预处理环节不容小觑。首先得确保所培养的细胞处于对数生长期，此时细胞活力旺盛、状态稳定，适合进行后续操作。收集细胞时，要采用温和的胰酶消化法，严格控制消化时间与温度，避免过度消化损伤细胞结构；接着用含血清的培养基终止反应，轻柔吹打制成单细胞悬液，随后离心沉淀细胞，弃去上清液，为防冻保护剂的加入做好准备。
精心挑选适配的防冻保护剂。常用的DMSO能有效降低冰点、减少冰晶形成，保护细胞免受低温损害。一般配置浓度在5%-10%，过高可能产生毒性，过低则起不到防护作用。将适量DMSO缓慢加入细胞沉淀，轻轻混匀，让细胞充分浸润其中，这一步动作要轻缓，防止细胞因剧烈冲击受损。
规范的分装流程至关重要。把处理好的细胞悬液按需求分装到无菌冻存管中，每管容量不宜过多，通常1-2毫升为宜，预留一定空间防止液体膨胀破裂冻存管。密封好后，做好清晰标记，注明细胞名称、代次、日期等关键信息，方便日后查找取用。
循序渐进的降温过程是核心步骤。直接投入液氮会使细胞瞬间遭受巨大温差而死亡，需借助程序降温仪，以每分钟1℃-3℃的速率缓慢降温至-80℃左右，再放入液氮罐长期储存；若没有专业仪器，也可将冻存管置于厚壁泡沫盒等隔热材料中，层层包裹棉花，放置在-80℃冰箱过夜后再转移至液氮环境。
日常管理也不容忽视。定期检查液氮罐内液位高度，及时补充液氮，保证细胞始终浸没在液氮之下；拿取细胞时戴好防护手套，防止冻伤，严格遵循无菌操作原则，避免交叉污染，如此才能确保人结肠癌细胞株在液氮“呵护”下长久维持活性，为科研持续助力。
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