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ATCC细胞株保温的方式

原载自:www.co-bioer.com[行情动态]  2016-02-22  浏览次数:1517

   ATCC细胞株保温的方式除有的仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA试剂盒应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui后将ELISA板放在湿纱布上。
  ATCC细胞株温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1~2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过*,以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中一般不予采用。
  怎样才能知道我购买的ATCC细胞株质量怎么样、是否为伪劣产品?现在市场上有很多利用伪劣细胞株坑害科研工作者,唯利是图,直接无视科学研究的严谨性。那么我们要如何去判断一个ATCC细胞株产品的质量呢?下面一起来看看细胞株内在质量检测方法大曝光!
  *、利用干扰实验即可辨别ATCC细胞株是否检测目的抗原具体方法如下:
  1.将针对细胞株特异性的重组蛋白抗原和细胞株中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液2.37℃孵育15分钟后,ATCC细胞株代替原细胞株3.后续操作按照ATCC细胞株说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物4.实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和细胞株抗体不匹配,细胞株检测抗体针对的是非目的抗原,ATCC细胞株该细胞株为伪劣假造细胞株。
  5.如果标准曲线无线性,则说明细胞株检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际细胞株抗体的检测作用,则该细胞株检测抗体针对的是目的抗原。
  ATCC细胞株湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。ATCC细胞株室温温育时,只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。
 

 

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