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原载自：www.co-bioer.com[行情动态] 2019-04-03 浏览次数：1138

　　我们来了解下ATCC细胞的活化方式吧

　　ATCC细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。

　　传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

　　ATCC细胞的细胞活化方式：

　　1.冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。

　　2.细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。

　　3.材料：37℃恒温水槽、新鲜培养基、无菌吸管/离心管/培养瓶、液氮或干冰容器。

　　ATCC细胞的解冻：

　　(1)操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。

　　(2)自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。

　　(3)将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。

　　(4)取出冷冻管，立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以70%酒精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。

　　(5)取出解冻之细胞悬浮液，缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1：10-1：15)，混合均匀，放入CO2培养箱培养。取0.1ml解冻细胞悬浮液作存活测试。

　　(6)解冻后是否立即去除冷冻保护剂，依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂。倘若要立即去除，则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10ml培养基之离心管内，离心1000rpm，5分钟，移去上清液，加入新鲜培养基，混合均匀，放入CO2培养箱培养。

　　(7)若不需立即去除冷冻保存剂，则在解冻培养后隔日更换培养基。