布鲁顿激酶（BTK）是 BCR 通路的关键酶之一。BCR 信号启动后，BTK 磷酸 化并激活磷脂酶 Cγ2 （PLCγ2），进而激活 NF-κB。BTK 突变最初是在 x 连锁无丙种球蛋 白血症（XLA）患者中发现的。BTK 在 CLL、MCL、DLBCL 和其他类型淋巴瘤中的进一 步研究使其成为治疗癌症的有利靶点。此外，BTK 已被证明在 toll 样受体介导的感染因子 识别和 Fc 受体信号传导中起作用。其中，Fc 受体信号在 BTK 信号传导中尤为重要。肥大 细胞、嗜碱性细胞、单核细胞、巨噬细胞等免疫细胞在炎症和过敏反应中发挥重要作用， 这些炎症和过敏反应是由高亲和力 IgE 受体（FcεRI）交联引起的，激活细胞内信号通路， 导致脱颗粒和释放组胺和其他促炎细胞因子。因此，自身免疫条件下的组成型 BTK 激活导 致 FcεRI 的激活。除此之外，免疫细胞如巨噬细胞上的 Fcγ受体（FcγR）也在肿瘤特异性 抗体介导的涉及 BTK 的免疫应答中发挥重要作用。BTK 还被发现是 NLRP3 炎性体的直接 调节剂。

      Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell 药靶细胞，通过基因编辑的方式 将 BTK 的 481 位氨基酸半（C）突变为。
 

Figure 1. Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell细胞的构建原理图

Figure 2. Sanger of  Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell.


2. DdPCR of  Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell

Figure 3. A： BTK WT Parental Cell；B：Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell。通道1 蓝色微滴代表BTK C481S 突变阳性，通道2 绿色微滴代表该位点为阴性野生型


3. Anti-proliferation assay

Figure 4. Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell-CTG 验证结果.