FLT3-ITD 基因是 FLT3 基因的一种突变形式，属于 FMS 样激酶家族，位于人类 13 号染色体长臂（13q22.2）。该基因编码的蛋白是一种跨膜受体蛋白，属于 III 型受体激酶（RTK）家族成员，在造血细胞的生长、增殖和分化中发挥关键作用。 FLT3-ITD 突变是 FLT3 基因近膜结构域的内部串联重复，通常发生在 14/15 号外显子 上，插入的重复序列长度一般 3-400 bp 不等，且总是以三倍的倍数出现，保留转录本的阅 读框。这种突变导致 FLT3 蛋白在无配体结合的情况下发生二聚体化并持续自我磷酸化， 增强激活激酶活性，使得下游信号通路（如 RAS/MAPK、PI3K/AKT 等）持续激活， 导致细胞增殖失调。

      BaF3（小鼠原 B 细胞）的生长和增殖需要 IL-3 的维持。通过引入各种表达激酶的基因， 能作为 BaF3 的驱动基因，让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖，进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因，用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用，原理及流程见下图所示。
 

Figure 1. FLT3-ITD[D835Y] BaF3 细胞的构建原理图

1.FLT3-ITD [D835Y]/BaF3

Figure 2. WB of FLT3-ITD [D835Y]/BaF3.

2. Anti-proliferation assay

Figure 3. CTG Proliferation Assay of FLT3-ITD [D835Y] BaF3(C3）.