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药靶细胞株 > kinase激酶细胞株 > CBP73369TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株

TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株
名称 TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株
型号 CBP73369
报价
特点 TPR-MET [Y1203H]/BaF3
  • 详细内容

TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株       TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株


I. Background

     激酶(RTKs)是跨膜蛋白,在信号通路的启动和调节中起重要作用。大多数 RTK 在细胞外配体结合时被激活,促进细胞内磷酸化的传递,从而驱动信号传导。

     MET 是一种受体激酶(RTK),参与发育和伤口修复的信号通路。MET 的激活依 赖于配体与细胞外受体的结合,从而促进二聚化、细胞内磷酸化和相关信号蛋白的募集。 c-MET 是肝细胞生长因子(HGF)激酶受体,MET 与 HGF 结合后,发生自身磷酸化并 激活下游 PI3K/AKT、RAS-MAPK、β-catenin 信号通路等多条信号通路,从而发挥其促细 胞增殖、细胞生长、细胞迁移、侵袭血管及血管生成等效应,在组织正常发育和肿瘤进展 中发挥关键作用。HGF/MET 通路异常与肿瘤的发生和转移相关并诱导耐药性的产生,包 括 MET 基因重排、基因突变、基因扩增和过表达。

     TPR-MET 重排是由 1 号染色体上的 TPR(易位启动子区)位点与染色体上的 MET 位点 衍生的序列的 5 '区域融合引起的。融合分子 TPR-MET 包含 cMET 原癌基因的激酶 结构域,TPR 序列由组成启动子和开放阅读框组成。它不需要依赖 HGF 的刺激下其激酶活 性持续很高,并且本身的呈现被磷酸化状态,从而引起 MET 信号通路的异常激活 和细胞增殖、运动及血管和其他肿瘤微环境状态的改变,最终成为肿瘤发生和进展的驱动 因素。

     致癌突变的激活也可以发生在 MET 的其他结构域,包括激酶结构域(TKD),导 致与配体无关的受体磷酸化和信号传导。在约 13-20%的Ⅰ型乳头状肾细胞癌(pRCC)中发 现 MET TKD 的激活遗传性或散发性点突变,并通过影响激活环的构象、促进激酶结构域 磷酸化和促进下游致癌信号级联反应导致 MET 受体的组成性激活。在 pRCC 中发现的 MET 激活突变的种类包括:V1092I (V1110)、H1094Y/R/L (H1112)、H1124D (H1142)、 L1195F/V (L1213)、F1200I (F1218)、V1188L (V1206)、Y1220I (Y1238)、D1228H/N (D1246)、Y1230C/D/H (Y1248)、M1131T (M1149)和 M1250T (M1268)。这些激活的 MET 突变也可以引起对 MET TKIs 的抗性,从而引起对 MET TKI 的获得性耐药。

II. Description
     BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。通过引入各种表达激酶的基因, 能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见下图所示。

TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株

Figure 1.
TPR-MET[Y1230H] BaF3 细胞的构建原理图

III. Introduction
Cell Line Name:TPR-MET [Y1230H]/BaF3
Host Cell:Ba/F3
Stability:16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium:90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium:RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml puromycin
Mycoplasma Status:Negative
IV. Representative Data

1.WB of TPR-MET [Y1230H]/BaF3

TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株



Figure 2. WB of TPR-MET [Y1230H]/BaF3

2.Sanger of TPR-MET [Y1230H]/BaF3



TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株


Figure 3.TPR-MET [Y1230H]/BaF3 Fusion



TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株


Figure 4.TPR-MET [Y1230H]/BaF3 Y1230H


3. Anti-proliferation assay

TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase细胞株


Figure 5. CTG Proliferation Assay of TPR-Met [Y1230H] BaF3 (C1).




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